Портреты Иоганнеса Куспиниана и его жены Лукас Кранах Старший написал в 1503-1504 годах. Тогда молодой художник жил в Вене. В тот период это был центр гуманистической культуры, там жили и работали известные ученые, знатоки античности, медики, математики, историки, литераторы. Здесь Кранах познакомился с гуманистами и создал ряд замечательных портретов. Портреты медика и историографа 29-летнего доктора Иоганна Куспиниана и его 16-летней жены Анны по праву считаются одними из лучших в старой немецкой живописи.
Художник создал яркие образы людей ренессансной эпохи. Молодой гуманист изображен с книгой в руках на фоне типично немецкого пейзажа с замком и церковью на горе. Устремленный вдаль испытующий взор дает ощутить характерные черты нового поколения немецких ученых. У молодой жены сосредоточенный взгляд, даже немного суровый. Очевидно художник таким образом показал ее искания и размышления.